%0 Journal Article %T 地中海拟无枝菌酸菌u-32硝酸还原酶的基因克隆 %A 李果龙 杨蕴刘 焦瑞身 %J 生物工程学报 %D 1994 %X outhern杂交分析表明在地中海拟无枝菌酸菌u-32染色体dna和黑曲霉niad(硝酸还原酶基因)之间存在着明显的同源性。利用异源niad探针从地中海拟无枝菌酸菌u-32基因文库中筛选得到一个能与niad杂交的5.0kb的pstⅰ片段。该片段经同位素标记后能与地中海拟无枝菌酸菌u-32染色体上一个相同的pstⅰ片段杂交,位于这一片段上的2.1kbsmaⅰ—ecorⅴ片段只能与以硝酸盐为唯一氮源的总rna杂交,而不能与相同条件下以铵盐为唯一氮源的总rna杂交,这些结果表明,所克隆到的5,0kbpstⅰdna片段含有地中海拟无枝菌酸菌u-3z的硝酸还原酶基因。这是好氧细菌硝酸还原酶基因克隆的首次报道。由该酶蛋白分子量推测,其结构基因大小在1.5kb左右,进一步的杂交分析发现在5.0kb的pstl片段中含有完整的nr基因。用20种限制酶对重组质粒pjll进行了限制酶酶谱的构建。发现有10种酶在pjll外源片段上无切点,6种酶为单切点,ecorⅰ与smaⅰ各有两个切点。 %K 地中海拟无枝菌酸菌 %K 硝酸还原酶 %K 基因克隆 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=94030200&flag=1