%0 Journal Article %T 昆虫细胞制备aav-itr基因表达微载体 %A 李泰明? %A 潘俊杰? %A 祁静? %A 张春? %J 生物工程学报 %P 1230-1238 %D 2015 %R 10.13345/j.cjb.140485 %X aav-itr基因表达微载体是只含有腺相关病毒(adeno-associatedvirus,aav)倒置末端重复序列(invertedterminalrepeats,itr)、基因表达顺式元件和目的基因,而不含有其他外源dna序列的双链或单链dna。本研究利用杆状病毒表达系统,制备得到两种重组杆状病毒bac-itr-egfp和bac-inrep,并将二者的p3代病毒共同感染昆虫细胞spodopterafrugiperda(sf9),抽提小分子量dna,获得aav-itr-egfp基因表达微载体,2×107的sf9细胞抽提可以得到100μgaav-itr-egfp基因表达微载体,核酸电泳显示aav-itr-egfp基因表达微载体主要以单体和二聚体的形式存在。将aav-itr-egfp基因表达微载体通过polyethylenimine(pei)转染hek293t细胞,24h后荧光显微镜观察有egfp表达,48h后达到高峰,转化效率达到65%。 %K 基因治疗 %K 基因表达微载体 %K 杆状病毒表达系统 %K 非病毒载体 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc15081230&flag=1