%0 Journal Article %T 利用优化改造的家蚕杆状病毒表达系统提高ns1表达产量 %A 李国辉? %A 李芒芒? %A 周倩? %A 胡朝阳? %A 唐琦? %A 姚勤? %J 生物工程学报 %P 591-602 %D 2015 %R 10.13345/j.cjb.140403 %X 为优化家蚕杆状病毒表达系统,提高外源基因的表达产量。文中通过同源重组技术,用串联的氯霉素基因(cm)表达盒和绿色荧光蛋白基因(egfp)表达盒将其替换,从而获得chitinase和cysteinprotease两个基因缺失的家蚕杆状病毒载体。通过转座,将多角体启动子控制的家蚕二分浓核病毒(bmbdv)ns1基因表达盒,定点插入到改造后的该分子载体中。将重组载体转染bmn细胞,获得能表达家蚕二分浓核病毒(bmbdv)ns1的缺失型重组病毒;另外,将多角体启动子控制的ns1基因转座到野生型bm-bacmid中,获得能表达bmbdvns1的野生型重组病毒。将这两种病毒分别皮下注射家蚕,对感染后的家蚕血液中ns1表达水平进行比较,发现缺失chitinase和cysteinprotease重组病毒感染的家蚕血液中,ns1的表达量是对照组的3倍,从而建立了一种高效表达可溶性ns1蛋白的方法,为靶蛋白的结构与功能研究奠定基础。 %K 家蚕杆状病毒载体 %K 家蚕二分浓核病毒 %K ns1 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc15040591&flag=1