%0 Journal Article %T 人肿瘤坏死因子受体的配体胞外段的原核表达及分析 %A 焦艳丽? %A 郑纺? %A 李晓霞? %A 王宝利? %A 郭善一? %J 生物工程学报 %P 708-713 %D 2009 %X 新近报道糖皮质激素诱导的肿瘤坏死因子受体的配体(gitrl)具有抑制前体破骨细胞的作用,故命名为osteostat,为深入研究其功能和机制,本研究原核表达人gitrl胞外段并进行活性分析。利用限制性内切酶eco31i获得大肠杆菌偏嗜性gitrl的胞外段cdna序列,构建了基于pqe-30xa的原核表达载体,并在m15[prep4]菌株中经iptg诱导表达带有his融合标签的gitrl重组蛋白,主要以包涵体形式存在。经体外包涵体变性、复性及纯化后,采用sds-page和westernblotting进行分析和鉴定。同时建立了报告基因技术检测gitrl重组蛋白生物活性的方法,简单便捷、灵敏而且周期短,利用此方法分析了重组gitrl胞外段表达蛋白的生物活性。 %K gitrl %K 原核表达 %K 报道基因 %K 偏嗜性 %K 限制性内切酶eco31i %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc09000708&flag=1