%0 Journal Article %T 抗cd3基因工程嵌合抗体igg在哺乳动物细胞中的表达和活性测定 %A 邵晓枫 徐晨 许元富 熊冬生 刘银星 杨纯正* %J 生物工程学报 %D 2003 %X 利用基因工程方法将鼠源性抗cd3抗体hit3a的可变区和人源抗体(igg)的完整的恒定区连接起来,构建全抗型抗cd3嵌合抗体,该型抗体具有较低的免疫源性可作为免疫抑制剂应用于器官移植,减少受体产生免疫排斥,提高移植器官的存活率。利用pcr方法从抗cd3scfv重组噬菌体表达载体pcantab5e上扩增抗cd3抗体的轻链和重链可变区,将轻链和重链可变区组装到含有人抗体(igg)恒定区的表达载体中,构建抗cd3嵌合抗体igg的轻链和重链表达载体pkn100和pg1d105,并用脂质体法共转染cho细胞。结果证明,抗cd3嵌合抗体的vl和vh与hit3a抗体的vl和vh完全相符,elisa和westernblot检测结果证实转染细胞的培养上清中含有抗cd3嵌合抗体igg的表达,表达产物能与jurkat细胞结合,并能竞争性抑制hit3a抗体和jurkat细胞结合活性,3h-tdr掺入实验表明,抗cd3嵌合抗体与亲代抗体hit3a一样,具有促进外周血单核细胞增殖的作用。我室构建的全抗型抗cd3嵌合抗体分子表达载体可在cho细胞中稳定表达,表达产物有较好生物活性,具有潜在的临床应用价值。 %K 基因工程抗体 %K 抗cd3抗体 %K 嵌合抗体 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=03050527&flag=1