%0 Journal Article %T 中华鲟半胱氨酸蛋白酶抑制剂在毕赤酵母中的表达和活性分析 %A 马冬梅?? 白俊杰* 简清 劳海华 叶星 罗建仁 %J 生物工程学报 %D 2003 %X 为研究鱼类半胱氨酸蛋白酶抑制剂(cystatin)的功能并探索其在水产加工和病害防治中的应用潜力,将pcr改造后的编码成熟肽中华鲟(acipensersinensis)cystatin基因亚克隆到毕赤酵母整合型表达载体ppiczαa,氯化锂法转化毕赤酵母菌株gs115,构建表达cystatin的酵母基因工程菌。经甲醇诱导、sdspage检测培养基上清液,表明中华鲟cystatin在毕赤酵母中实现了高效表达,重组cystatin表达量约为215mg·l-1。纯化后重组蛋白纯度达94.2%。生物活性检测结果表明,1μg重组中华鲟cystatin约能抑制15μg木瓜蛋白酶的水解活性。 %K 中华鲟半胱氨酸蛋白酶抑制剂 %K 毕赤酵母 %K 基因表达 %K 蛋白酶抑制活性 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=03050598&flag=1