%0 Journal Article
%T 利用启动子缺陷型打靶载体敲除牛胎儿成纤维细胞中的prnp
%A 朱采红？
%A 俞国华？
%A 李蓓？
%A 许媛媛？
%A 俞慧清？
%A 陈建泉？
%A 钱旻？
%A 成国祥？
%J 生物工程学报
%P 1988-1992
%D 2008
%X 利用启动子捕获对中靶细胞进行富集是提高体细胞基因打靶效率常用的策略之一。敲除动物的prnp可使其具有抵抗prion病感染的能力。采用启动子捕获策略,构建了牛prnp启动子缺陷型打靶载体boprneo,线性化后,再通过电穿孔转染牛胎儿成纤维细胞bff,用250mg/mlg418进行药物筛选,共得到99个药物抗性细胞克隆。对细胞克隆进行pcr、测序及southernblotting鉴定,结果表明,其中的4个细胞克隆为中靶细胞,说明牛胎儿成纤维细胞中的prnp一条等位基因被成功敲除。本研究为牛prnp的敲除提供了一种简单、安全、有效的方法。
%K 基因打靶
%K 启动子捕获策略
%K prion病
%K 牛胎儿成纤维细胞
%K prnp
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc08111988&flag=1