%0 Journal Article %T 心肌特异性启动子表达载体的构建及其功能鉴定 %A 何文俊? %A 李世崇? %A 叶玲玲? %A 王启伟? %A 王海涛? %A 谢靖? %A 刘红? %A 陈昭烈? %J 生物工程学报 %P 1546-1551 %D 2009 %X 本研究构建了心肌特异性a-肌球蛋白重链(a-mhc)启动子表达载体,并对其功能进行了鉴定。以小鼠基因组dna为模板,通过pcr扩增得到a-mhc启动子,插入pgem?-teasy载体,酶切后回收目的片段,置换pcdna3.1(+)-egfp-hygro中的cmv启动子,成功构建出a-mhc-egfp表达载体。对其进行酶切鉴定后,通过电穿孔法转染原代小鼠心肌细胞,转染阳性的心肌细胞出现绿色荧光,而非心肌细胞无荧光出现。a-mhc-egfp表达载体具有心肌特异性表达特性,可用于纯化胚胎干细胞来源的心肌细胞。 %K 心肌细胞 %K 胚胎干细胞 %K a-肌球蛋白重链 %K 启动子 %K 增强型绿色荧光蛋白 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc09001546&flag=1