%0 Journal Article
%T 恒河猴mhc-i类分子mamu-a*02与猴免疫缺陷病毒抗原表位复合物的纯化和晶体学分析
%A 戴连攀？
%A 周斌？
%A 齐建勋？
%A 马颖？
%A 高福？
%A 杨希才？
%J 生物工程学报
%P 1028-1034
%D 2009
%X 恒河猴是研究人免疫缺陷型病毒(hiv)感染与获得性免疫缺失综合征(aids)疫苗研制的最为重要的动物模型,其组织相容性复合体(mhc)结构的解析将有助于了解hiv?免疫逃逸机制。本研究克隆了1个恒河猴mhc-i类分子mamu-a*02轻链(β2m)基因并插入到pet21a(+)原核表达载体中,成功构建了重组表达质粒pet21a(+)-mamu-β2m。pet21a(+)-mamu-β2m和之前构建好的恒河猴mamu-a*02重链(α)重组质粒pet21a(+)-α分别转入bl21(de3)大肠杆菌表达体系中,iptg诱导表达。mamu-a*02重链和猴β2m目的蛋白在bl21(de3)中以包涵体形式表达。重链、轻链的包涵体蛋白和mamu-a*02限制的猴免疫缺陷病毒(siv)nef表位多肽(yy9)通过稀释法共复性。高纯度的复合物蛋白经分子筛层析和阴离子交换层析纯化后获得。复合物晶体利用悬滴法筛选并优化,并在0.1mol/lbis-tris(ph5.5)、2.0mol/l(nh4)2so4条件下收集一套2.8?分辨率的x-射线衍射数据。晶体属于正交空间群p212121,其晶胞参数为a=128.99?,b=129.01?,c=129.03?,α=β=γ=90°。该数据可通过分子置换法解析。
%K 猴免疫缺陷病毒(siv)
%K mamu-a*02-nef_yy9复合体
%K 蛋白表达与纯化
%K x-射线晶体学
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc09001028&flag=1