%0 Journal Article %T 甘蓝型油菜与芝麻菜体的细胞杂交 %A 张传利? %A 杨志新? %A 桂雪梅? %A 刘雅婷? %A 毛孝强? %A 厦国银? %A 林良斌? %J 生物工程学报 %P 793-802 %D 2008 %X 为拓宽油菜育种的基因资源库,改良油菜品种,以甘蓝型油菜(brassicanapus)花油3号下胚轴和芝麻菜(erucasativa)下胚轴为材料分离制备原生质体;然后采用peg-高ca2+-高ph法进行原生质体融合,当peg浓度为35%,原生质体融合密度为5×105个/ml时,融合25min时,融合率可达18.2%。融合后在培养密度为1×105个/ml时,以附加1.0mg/l2,4-d+0.5mg/l6-ba+0.5mg/lnaa+200mg/l肌醇+300mg/l水解酪蛋白的改良的km8p为融合体培养基,以0.1mol/l蔗糖+0.2mol/l葡萄糖+0.2mol/l甘露醇作渗透稳定剂进行液体浅层培养,效果较好,愈伤组织再生率最高为6.8%。将融合体再生的小愈伤组织转移至培养基(b5无机盐+0.087mol/l蔗糖+0.2mg/l2,4-d+0.5mg/lnaa+0.2mg/l6-ba+0.5%agar,ph5.8)上增殖培养,待愈伤组织长至直径为3~5mm时,及时将其转至分化培养基(ms无机盐+0.087mol/l蔗糖+0.1mg/liaa+0.8mg/l6-ba+0.8%agar,ph5.8)中诱导不定芽再生,芽分化率为35.7%。当不定芽长为2~3cm时,将其切下转入附加0.5mg/liba+0.2mg/l6-ba的1/2ms生根培养基中诱导生根,14d左右即可形成再生植株,生根率可达88%。同时,以紫外线(60μw/cm2)照射芝麻菜原生质体,进行不对称融合,照射2min的获得了愈伤组织和再生植株,照射4min的只获得愈伤组织,而照射5min以上的没有获得愈伤组织,但其愈伤组织再生、增殖及植株再生均不如对称融合。从细胞学鉴定的21块杂种愈伤组织上再生出16株杂种植株。 %K 甘蓝型油菜 %K 芝麻菜 %K 原生质体融合 %K 不对称融合 %K 植株再生 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc08050793&flag=1