%0 Journal Article %T 日本血吸虫童虫裂解物对东方田鼠肝脏t7噬菌体展示cdna文库的筛选及阳性克隆分析 %A 贾人初? %A 孙毅? %A 刘金明? %A 傅志强? %A 苑纯秀? %A 石耀军? %A 陆珂? %A 孙焕? %A 李浩? %A 金亚美? %A 林矫矫? %J 生物工程学报 %P 733-739 %D 2008 %X 东方田鼠对血吸虫具有天然抗性。为筛选和分析东方田鼠抗血吸虫抗性相关基因,以日本血吸虫童虫可溶性裂解物为探针,筛选东方田鼠肝脏噬菌体展示cdna文库。经三轮筛选,特异性噬菌体得到有效富集(375倍)。随机挑取92个克隆进行序列测定,获得了19条有效est序列。其中13个条est序列与已知基因或表达序列标签同源,6个est序列与已知基因或表达序列标签均无同源性,为新的表达序列标签。将19个est序列的阳性噬菌体克隆和血吸虫童虫共培养,其中4号(genbankaccessionno.:ew968294)、13号(genbankaccessionno.:ew968303)、14号(genbankaccessionno.:ew968304)、15号(genbankaccessionno.:ew968305)、18号(genbankaccessionno.:ew968308)克隆均诱导了显著的杀虫效果。综合生物信息学分析结果及体外杀伤试验结果,编码casp8和fadd类似性细胞程序性死亡调节蛋白、a-2-hs-糖蛋白、m4蛋白、具有r3h结构域的一种mrna结合蛋白以及三种未知蛋白的编码基因(14、15、18号克隆)可能是东方田鼠抗血吸虫病抗性相关基因。为进一步研究东方田鼠抗血吸虫机理奠定了基础。 %K 日本血吸虫 %K 东方田鼠 %K 肝脏 %K 噬菌体展示cdna文库 %K 抗性基因 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc08050733&flag=1