%0 Journal Article
%T 具有a-淀粉酶分泌活性以及低双乙酰产量的啤酒酵母工程菌的构建
%A 张峰？
%A 王肇悦？
%A 刘楠？
%A 何秀萍？
%A 张博润？
%J 生物工程学报
%P 837-843
%D 2008
%X 扣囊复膜酵母(saccharomycopsisfibuligera)因具有较强的a-淀粉酶以及葡聚糖酶活性,使其在以淀粉为唯一碳源的培养基上能够良好的生长。从其基因组中克隆了a-淀粉酶的编码区,构建了由酵母磷酸甘油酸激酶基因(pgk1)启动子、酿酒酵母a-因子信号序列以及扣囊复膜酵母a-淀粉酶基因编码序列组成的基因表达盒。将该表达盒插入到质粒pplz-2的ilv2基因序列内部,使其两翼具有ilv2基因的同源区。将该表达盒通过同源重组的方式整合到啤酒酵母工业菌株ysf-5的a-乙酰乳酸合成酶(ahas)基因ilv2内部。在以淀粉为唯一碳源的培养基上进行转化子的筛选。通过多对引物pcr、a-淀粉酶活性以及ahas活性分析对转化子进行鉴定,得到一株具有a-淀粉酶分泌表达活性、较低ahas活性,并且发酵液中双乙酰产量也相对较低的啤酒酵母工程菌。该菌株在非选择压力条件下连续培养50代后仍然保持其遗传稳定性。还对ph、温度以及金属离子对该转化菌株的a-淀粉酶活性的影响进行了研究。由于所构建的菌株不含有非酵母来源的dna,所以生物安全性相对较高,对酵母育种以及啤酒生产工业都具有较为重要的意义。
%K 啤酒酵母工程菌
%K a-淀粉酶
%K 双乙酰
%K a信号肽
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc08050837&flag=1