%0 Journal Article %T h3n2型猪流感病毒m2蛋白表达分析 %A 王晓杜? %A 陈培君? %A 沈阳? %A 邱亚峰? %A 邓绪芳? %A 史子学? %A 彭丽娜? %A 罗金燕? %A 刘超? %A 马志永? %J 生物工程学报 %P 16-21 %D 2010 %X 流感病毒的m2蛋白在流感病毒复制中起着重要作用,是抗流感病毒的靶标分子。本研究以提取的病毒基因组rna作为模板,rt-pcr扩增h3n2亚型猪流感病毒m2基因,分别构建了重组原核表达载体和重组真核表达载体,建立了m2蛋白的原核和真核表达系统。通过大肠杆菌表达系统,制备了m2重组蛋白,并免疫大鼠制备了多克隆抗体。westernblotting和间接免疫荧光方法检测表明所制备的抗体能识别真核表达的m2蛋白和病毒感染细胞后表达m2蛋白,具有良好的特异性。重组m2真核表达载体转染vero细胞,表达的重组m2蛋白大小为20kda,定位于细胞浆中,与病毒感染细胞中的m2蛋白定位相同。westernblotting检测表明m2蛋白在病毒感染细胞12h后才能检出,晚于ns1、np和m1,属于病毒复制的晚期蛋白,可作为病毒复制晚期的指示分子。本研究为弄清m2蛋白在病毒复制过程中的生物学功能奠定了基础。 %K h3n2 %K 猪流感病毒 %K m2蛋白 %K 多克隆抗体 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc10000016&flag=1