%0 Journal Article %T 甲醇浓度对毕赤酵母表达重组人复合α干扰素分离纯化得率的影响 %A 吴丹? %A 储炬? %A 王永红? %A 庄英萍? %A 张嗣良? %J 生物工程学报 %P 1789-1796 %D 2011 %X 研究了毕赤酵母pichiapastoris表达的重组人复合α干扰素(cifn)时不同诱导甲醇浓度对cifn分离纯化得率的影响,并分析了原因。在5l罐中采用0.25、0.50和0.75%(w/v)三个甲醇浓度诱导时,在0.75%高甲醇浓度诱导下cifn表达水平最高,达到2.06g/l,是0.25%低甲醇浓度诱导的1.24倍,但是低甲醇浓度诱导下cifn分离纯化得率却高于高甲醇诱导浓度下3.75倍。另外,低甲醇浓度下发酵上清液cifn抗病毒活性为2.85×108iu/ml,较高甲醇浓度提高了4.48倍。进一步采用sds-page和native-page免疫印迹分析不同条件下发酵液中cifn存在状态,发现在高甲醇浓度下cifn容易形成大量的聚合体,分别为共价聚合和非共价聚合,而cifn单体含量较少,但是低甲醇浓度诱导下情况完全相反。最终在0.25%甲醇诱导下分离纯化1l发酵上清液可得0.73g单体cifn,是0.75%甲醇诱导下的3.84倍。 %K 毕赤酵母 %K 复合α干扰素 %K 甲醇浓度 %K 聚合体 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc11001789&flag=1