%0 Journal Article %T 青花菜与白菜间体细胞杂种获得与遗传特性鉴定 %A 廉玉姬? %A 林光哲? %A 赵小梅? %J 生物工程学报 %P 1586-1597 %D 2011 %X 为获得芸薹属白菜brassicacampestris与青花菜brassicaoleraceavar.botrytis的种间体细胞杂交体,以青花菜和白菜的子叶与下胚轴为材料,分离制备原生质体,用40%聚乙二醇(polyethyleneglycol,peg)进行原生质体融合。融合细胞在以0.3mol/l蔗糖、0.3mol/l葡萄糖为渗透稳定剂,附加0.2mg/l2,4-d+0.5mg/l6-苄氨基嘌呤(6-ba)+0.1mg/l1-萘乙酸(naa)+0.1mg/l激动素(kinetin,kin)的改良k8p培养基中液体浅层培养。将包埋于0.1%琼脂糖的8~10个细胞期的细胞在添加0.3mol/l蔗糖和2mg/l6-ba+2mg/l玉米素(zeatin,zea)+1mg/lnaa+0.5mg/lkin的kao培养基中诱导愈伤组织。愈伤组织转到ms+5mg/lzea+2mg/liaa诱导不定芽。将长1~2cm的不定芽转到1/2ms+0.2mg/lnaa诱导生根。将生根的植株转移到花盆,并对其杂种性质进行形态学、细胞学和分子生物学鉴定。结果表明,融合细胞培养2~7d后发生第1次分裂,培养35d后植板率为0.66%,不定芽再生率达3.7%。形态学观察显示,绝大多数再生植株的叶面积较大,株型和叶型为两种杂交亲本的中间型。染色体计数结果显示,再生植株染色体数目为2n=38。流式细胞仪测定dna含量显示,再生植株dna含量是亲本之和。随机扩增多态性dna(randomamplifiedpolymorphicdna,rapd)和基因组原位杂交(genomicinsituhybridization,gish)分析结果证明再生植株具有双亲基因组。体细胞杂种花粉育性比较低,杂交、回交后其育性逐渐获得恢复。 %K 体细胞杂交 %K 原生质体 %K 植株再生 %K 后代 %K 随机扩增多态性dna %K 基因组原位杂交 %K 细胞流式仪 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc11001586&flag=1