%0 Journal Article %T 灰葡萄孢菌激发子pebc1在毕赤酵母中的分泌表达及其生物活性分析 %A 张云华? %A 杨秀芬? %A 刘延锋? %A 玉山江? %A 邱德文? %J 生物工程学报 %P 1631-1636 %D 2011 %X 为了实现激发子pebc1编码基因在毕赤酵母中的分泌表达,采用pcr方法从灰葡萄孢菌bc-4-2-2-1菌株中扩增获得激发子pebc1的编码序列,将其亚克隆至酵母分泌型表达载体ppic9k中,以此片段构建了ppic9k-pebc1重组表达质粒。重组表达质粒经bglⅱ线性化处理,电击转化至毕赤酵母宿主菌gs115,经md、g418-ypd平板和pcr法筛选,获得了重组毕赤酵母菌gs115/ppic9k-pebc1。用甲醇诱导重组酵母菌表达目标蛋白,发酵液经sds-page电泳分析,在约39kda处出现特异目标条带。westernblotting检测结果说明,重组表达产物具有良好的抗原性。生物活性检测表明,酵母重组表达蛋白pebc1能够诱导拟南芥和黄瓜幼苗对灰霉病的抗性。 %K 激发子 %K pebc1基因 %K 毕赤酵母 %K 生物活性 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc11001631&flag=1