%0 Journal Article %T 溶葡球菌酶的定点突变与peg巯基定点修饰 %A 吴宏? %A 房伟? %A 袁璟? %A 彭惠? %A 张学成? %A 王永中? %A 肖亚中? %J 生物工程学报 %P 1623-1630 %D 2011 %X 为了建立聚乙二醇(peg)巯基定点修饰溶葡球菌酶的方法,并检验假定连接区的突变与修饰对酶活的影响,对溶葡球菌酶的假定连接区进行了巯基聚乙二醇定点修饰研究。通过分析溶葡球菌酶的结构特征,选择两个结构域之间的氨基酸(133-154aa)进行定点突变引入半胱氨酸残基。使用单甲氧基聚乙二醇马来酰亚胺(mpeg-mal)进行定点修饰,对修饰后的酶进行纯化并测定酶活性。结果表明定点突变的半胱氨酸残基peg修饰效率高、产物单一,运用简便的ni2+-nta柱亲和层析法实现了一步分离,获得了高纯度的目标蛋白,但在连接区进行定点突变及peg定点修饰后的酶活有不同程度的降低,表明假定连接区部分位点的peg修饰会对溶葡球菌酶的催化活性产生一定影响。 %K 溶葡球菌酶 %K 定点突变 %K peg巯基定点修饰 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc11001623&flag=1