%0 Journal Article %T 用构建的新型bmnpv载体在家蚕高效表达人β-干扰素 %A 邓继先 王少飞 杨琴 程萱 李琳 %J 生物工程学报 %D 1995 %X 构建了家蚕核多角体病毒(bombyxmorinuclearpolyhedrosisvirus,bmnpv)新型载体pbm92,该载体将多角体蛋白基因的起始密码atg改变为att,然后在多角体蛋白基因的+12位后连接有5个外源基因的克隆位点。将hulfn-β基因克隆在多角体蛋白基因的+12位后,构建了pbmifn+12;同时构建了huifn-β克隆在-3位后的转移载体pb.mifn-3。将两种转移载体dna分别与bmnpv基因组dna共转染bm—n细胞。利用重组病毒不产生多角体蛋白的特征,筛选重组病毒。用huifn-β基因探针与重组病毒dna进行杂交鉴定。重组病毒bmifn+12感染bm-n细胞,其上清ifn活性为2.0×106iu/ml,将bmifn+12注射5龄家蚕虫体,表达水平为5.o×107iu/ml,是hulfn-β基因克隆在多角体蛋白基因的-3位后获得的重组病毒表达量的2—4倍。构建的新型bmnpv载体能够在家蚕高效地表达huifn-β。家蚕虫体生产的rhulfn-β蛋白具有天然huifn-β的抗原性。 %K bmnpv %K 转移载体 %K β-干扰素 %K 基因表达 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=95020126&flag=1