%0 Journal Article %T 蛋白酪氨酸磷酸酶ptp1b催化活性区的原核表达及活性分析 %A 王生育? %A 颜江华? %A 潘阳霖? %A 李学军? %A 陈忠? %J 生物工程学报 %P 553-557 %D 2008 %X 从genbank获得人ptp1b催化活性区(ptp1bc)氨基酸序列(1~301aa),通过重叠pcr获得ptp1bc基因。构建pet-22b(+)/ptp1bc原核表达载体,转化大肠杆菌bl21(de3),阳性重组子iptg诱导表达,ni柱纯化蛋白。目的蛋白以包涵体的形式表达,表达量占菌体总蛋白30%以上。纯化后,蛋白纯度达95%以上。westernblotting结果表明所得的蛋白可与抗ptp1b抗体发生特异性结合;酶活实验证实复性的蛋白具有一定的磷酸酶活性。ptp1bc基因的构建、表达纯化及活性分析,为进一步的功能研究奠定了基础。 %K ptp1bc %K 基因表达 %K 蛋白纯化 %K 活性分析 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc08040553&flag=1