%0 Journal Article %T tail-pcr的改良及其在分离小麦基因启动子中的应用 %A 仇艳光? %A 田景汉? %A 葛荣朝? %A 赵宝存? %A 沈银柱? %A 黄占景? %J 生物工程学报 %P 695-699 %D 2008 %X 在经典tail-pcr(thermalasymmetricinterlacedpcr)的基础上,对其进行了如下四处改进:用10个碱基的rapd引物代替16个碱基的随机兼并引物作为pcr中的随机引物;将较低特异性循环的复性温度由44°c降至29°c;增加5个高特异性反应循环,减少5个较低特异性反应循环;用单引物对第三轮pcr产物进行初步鉴定。利用改进的tail-pcr方法分离了小麦x基因的5′未知的侧翼序列,与gus基因融合后转入拟南芥,通过组织化学检测分析表明分离到的5′侧翼序列具有启动子功能,同时说明改进的tail-pcr能更好地应用到较复杂基因启动子的分离。 %K 热不对称交错pcr %K 随机引物 %K 启动子 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc08040695&flag=1