%0 Journal Article
%T 重组人bmp6在大肠杆菌中可溶表达、纯化及活性分析
%A 雷荣悦？
%A 乔玉欢？
%A 闫继东？
%A 杨爽？
%A 朱天慧？
%J 生物工程学报
%P 452-459
%D 2008
%X bmp6是一种调节成骨细胞和成软骨细胞分化的骨诱导因子,在修复各种骨缺损方面具有很好的应用潜力。有诱骨活性的bmp6是多二硫键的二聚体蛋白,疏水性极强容易聚集沉淀。为了在大肠杆菌中可溶表达具有生物活性的重组人bmp6(rhbmp6),构建了具有trx、gst、mbp、cbd融合标签和his6标签的rhbmp6成熟肽原核表达载体,调节诱导温度和iptg浓度,比较不同融合标签和诱导条件对目的蛋白表达量和溶解性的影响。结果表明,mbp最能有效的增强rhbmp6的溶解性,诱导条件对溶解性影响较小。大肠杆菌bl21trxb(de3)这种硫氧还蛋白还原酶缺陷菌株为rhbmp6二硫键在胞质中形成提供了合适的氧化还原环境。mbp和bl21trxb(de3)相结合在细胞质中高效可溶表达出了bmp6融合蛋白二聚体。表达产物经亲和层析和凝胶排阻层析纯化后,能诱导成肌细胞系c2c12向成骨细胞方向转化。
%K bmp6
%K mbp
%K bl21
%K trxb(de3)
%K 可溶性
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc08030452&flag=1