%0 Journal Article
%T 人b防御素3和植物des-pglu1-brazzein融合蛋白表达菌的诱导条件优化及其活性分析
%A 李春丽？
%A 徐雪丽？
%A 郑振宇？
%A 赵卫东？
%J 生物工程学报
%P 485-490
%D 2008
%X 对人b防御素3和植物甜蛋白des-pglu1-brazzein嵌合基因的工程菌株bl-pet-hbd3-bra的iptg诱导表达条件进行了研究,同时对所表达的目的蛋白进行了纯化和活性分析。iptg浓度、诱导时间和诱导温度对菌株生长和目的蛋白表达的试验结果显示:所取的iptg浓度(0.2~1.0mmol/l)对菌株生长和目的蛋白的表达无显著影响(p>0.05);菌株的生物量随着诱导时间的延长而增加,6h优于4h(p<0.01),但是蛋白的表达量无明显增加(p>0.05);其中温度是重要的影响因素,在30°c诱导时,目的蛋白的表达量占总蛋白的35%左右。进一步的研究表明,菌株在30°c~32°c生长,在30°c诱导最优。对目的蛋白的活性分析表明,所得到的hbd3-bra融合蛋白有甜味,其甜度大约是蔗糖的200倍,但是其杀菌活性很弱,经凝血酶切割后,des-pglu1-brazzein的甜度大大提高,大约为蔗糖甜度的600倍,重组hbd3对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有明显的抑菌活性。
%K 人b防御素3
%K 植物甜蛋白
%K 大肠杆菌
%K 高效表达
%K 优化
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc08030485&flag=1