%0 Journal Article %T 凝乳酶原mrna的分离及其cdna克隆的鉴定 %A 谭思元 刘年娟 杨开宇 %J 生物工程学报 %D 1988 %X 用异硫氰酸胍法从牛胃粘膜组织中分离到poly(a)rna。经电泳分析、体外翻译活性分析及norihern转移杂交分析,结果表明,poly(a)rna中含有完整的,具有生物活性的凝乳酶原mrna,大小为16s。从poly(a)rna建立的cdna库中,以c500-pepsinogen为探针进行初级筛选,集中阳性克隆成为凝乳酶原和相关胃蛋白酶原cdna富集库。从寓集库中选出插入片段带有凝乳酶原基因所特有的ecori切点的19个克隆。经限制性内切酶谱分析确定pct5为凝乳酶原基因克隆,其5’端缺少80bp。以pct5的插入片段为探针,从cdna库中进一步筛选得到pctl5。酶谱分析表明,pctl5的两端均足以覆盖编码区域,而在917位左右约有110bp的缺失。从而不仅充分证明了分离的poly(a)rna中含有全链长的凝乳酶原mrna,而且还可通过拼接pct5及pctl5获得完整的凝乳酶原基因。 %K 重组dna %K 分子克隆 %K 凝乳酶原 %K 缺失 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=88020091&flag=1