%0 Journal Article %T 以潮霉素b抗性为选择标记的深黄被孢霉原生质体转化 %A 张学炜? %A 王笑梅? %A 李明春? %A 魏东盛? %A 陈雪? %A 邢来君? %J 生物工程学报 %D 2007 %X 利用亚硝基胍(mnng)诱变方法筛选了一株深黄被孢霉潮霉素b敏感型菌株m6-22-4。采用peg介导的方法,将含有e.coli潮霉素b抗性标记的pd4质粒转入敏感株m6-22-4原生质体,并在潮霉素b浓度为400μg/ml的选择培养基上筛选转化子,获得了1.6~2.8个转化子/μg质粒dna的转化频率。稳定性实验表明,质粒线性化后所获得的转化子在pda培养基上传代10代以后,转接到选择平板上有31.6%仍具有hmb抗性;随机挑选了3个转化子,通过pcr方法检测到潮霉素抗性基因的存在,southern杂交发现,潮霉素抗性基因已经以1~2拷贝数整合到深黄被孢霉m6-22-4染色体上,这是深黄被孢霉转化系统的首次报道。 %K 深黄被孢霉 %K 潮霉素抗性 %K 原生质体 %K 转化 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=07030462&flag=1