%0 Journal Article
%T 蚯蚓纤溶酶基因（efp-ⅰ）在大肠杆菌中的克隆、表达及活性分析
%A 赵晓瑜？
%A 李晓霞？
%A 侯艳？
%A 静天玉？
%J 生物工程学报
%D 2007
%X 从genbank查询到的蚯蚓纤溶酶（earthwormfibrinolyticenzyme，efe）基因序列中，只有ay438624翻译的蛋白质序列与天然efp-ⅰ在n-端具有较高的相似性。根据该基因的5′与3′序列设计引物，通过rt-pcr从赤子爱胜蚓(eiseniafetida)获得一个完整的基因（genbank，dq418454）。序列分析证明，由该基因编码蛋白质的n-末端与天然efp-ⅰ的n-末端的氨基酸顺序完全相同。scanprositepredictionprograms分析显示，该基因与ay438624相似性极高，二者均属于胰蛋白酶家族；不同的是，该基因编码蛋白质的序列中含有n-糖苷键的结构域，所以dq418454是efp-ⅰ中的一个新基因。在此基础上，构建了该基因的原核表达载体pmal-c2x-efp-ⅰ，并进行了转化、诱导和表达。westernblotting证明，表达产物同时具有mbp和efp-ⅰ的抗原特异性，是mbp和efp-ⅰ的融合蛋白（mbp-efp-ⅰ）。经亲和层析分离纯化的mbp-efp-ⅰ，在酪蛋白平板和纤维蛋白平板上表现出明显的纤溶酶活性。
%K 赤子爱胜蚓
%K 蚯蚓纤溶酶
%K 基因克隆
%K 融合表达
%K 纤溶酶活性
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=07030452&flag=1