%0 Journal Article
%T 戊型肝炎病毒ⅳ型orf2蛋白在汉逊酵母中的表达
%A 苏彩霞？
%A 顾美荣？
%A 张萍？
%A 金贞姬？
%A 孟凡红？
%A 陈尔佳？
%A 杨喆？
%A 刘勇？
%A 王佑春？
%J 生物工程学报
%D 2007
%X 为了寻求新型表达系统来研制戊型肝炎基因工程疫苗，利用甲基营养型汉逊酵母（hansenulapolymorpha）系统表达戊型肝炎病毒（hepatitisevirus,hev）ⅳ型结构区orf2编码蛋白第112-607氨基酸片段。为实现目的基因在汉逊酵母中的高效表达，根据汉逊酵母偏爱密码子优化设计目的基因，用搭桥pcr法合成优化后的基因序列，并克隆到多拷贝表达载体上，转化汉逊酵母营养缺陷宿主菌atcc26012(ura3-)，在选择培养基上培养，运用pcr法筛选得到携带外源基因的重组菌株，然后用含甲醇的培养基诱导表达，对表达产物进行sds-page、elisa和westernblot检测和鉴定。sds-page实验结果表明目的蛋白分子量约为56kd，表达量占菌体总蛋白的12%；elisa检测结果表明表达产物为具有免疫反应性的hevorf2蛋白，elisa效价最高可达1∶2048，目的蛋白表达量随着基因拷贝数的增加呈升高的趋势；westernblot鉴别实验结果证实表达产物与hev多抗有特异性抗原抗体结合反应。hev结构区orf2蛋白在汉逊酵母中的成功表达，为研制基因工程戊型肝炎疫苗奠定了基础。
%K 戊型肝炎病毒
%K orf2基因
%K 汉逊酵母
%K 表达
%K 56kd蛋白
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=07010073&flag=1