%0 Journal Article %T prrsvnj-a株orf5基因a表位的修饰与糖基化位点的突变对其dna疫苗免疫效力的影响 %A 郑其升? %A 李鹏? %A 毕志香? %A 牛明福? %A 曹瑞兵? %A 周斌? %A 陈德胜? %A 陈溥言? %J 生物工程学报 %D 2007 %X 为了提高prrsvorf5基因的免疫效力,对orf5基因进行了改造,将cpg序列和通用型辅助性t淋巴细胞表位插入a表位与b表位之间,并对n33与n51位糖基化位点进行了点突变,获得改造的orf5基因。在此基础上构建了由两个cmv启动子调控的共表达改造的orf5(morf5)与orf6基因的真核表达质粒pcdna-m5a-6a。经western-blot与ifa验证真核质粒的体外表达后,免疫6周龄balb/c小鼠,利用微量中和试验检测免疫后的中和抗体,利用mtt法检测免疫后淋巴细胞的增生情况,并与未改造orf5基因真核表达质粒pcdna-5a-6a、弱毒疫苗以及灭活疫苗的免疫效果进行比较。结果表明,pcdna-m5a-6a不但能够刺激免疫小鼠在较短的时间内产生更高水平的中和抗体,而且可以诱导产生更强烈的t淋巴细胞增殖反应。所构建的共表达prrsv改造的orf5基因与orf6基因的dna疫苗pcdna-m5a-6a,能够较好的诱发小鼠产生较高的特异性针对prrsv的中和抗体和细胞免疫应答,为研究能够更好地防制prrsv的新型疫苗提供了新的思路。 %K 猪繁殖与呼吸综合征病毒 %K orf5基因 %K 基因改造 %K dna疫苗 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=07010033&flag=1