%0 Journal Article %T 毕赤酵母发酵生产颗粒性乙肝表面抗原的条件优化 %A 刘如石? %A 林亲录? %A 孙意? %A 邱义兰? %A 徐甜? %A 丁海? %A 郭向荣? %J 生物工程学报 %P 2098-2105 %D 2008 %X 乙型肝炎病毒的流行对人们的生命健康造成了极大的威胁,而有效准确的诊断和预防性疫苗是阻止其流行的主要手段,乙肝表面抗原是诊断试剂和疫苗的主要成分。本试验在构建稳定表达hbsag的毕赤酵母菌株后,对其发酵条件进行了研究。采用摇瓶分批培养方法,探讨了不同培养基、溶解氧、诱导物甲醇的浓度以及ph值等因素对菌体生长与重组蛋白表达的影响。在10l发酵罐上采用分批补料培养的方法研究了进行扩大培养生产重组hbsag。结果表明,fbs无机盐合成培养基是理想的工业发酵培养基,溶解氧对菌体的生长与表达有显著的影响,甲醇诱导最佳终浓度为1%(v/v),发酵的最适ph值为5.4~6.0。发酵罐放大培养后,elisa和sds-page分析表明重组hbsag获得了高效表达,最终菌体生物量达到310od600,表达量达到27mg/l。电子显微镜观察表达重组乙肝抗原可以自组装为22nm类病毒颗粒,为hbv的新一代早期血清学诊断和疫苗的大规模生产提供了一定的参考。 %K 发酵参数 %K 高表达 %K 优化筛选 %K 毕赤酵母 %K 重组乙肝表面抗原 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc08122098&flag=1