%0 Journal Article
%T 两种udp-葡萄糖脱氢酶对透明质酸生物转化的影响
%A 郭东会？
%A 韩剑？
%A 刘伟丰？
%A 傅震洲？
%A 朱启忠？
%A 陶勇？
%J 生物工程学报
%P 1691-1700
%D 2014
%R 10.13345/j.cjb.140144
%X 分别从大肠杆菌和化脓链球菌中扩增出编码udp-葡萄糖脱氢酶基因ecohasb和spyhasb，并将其插入t7表达载体prx2构建重组质粒prxeb和prxsb。在大肠杆菌bl21(de3)中重组表达，并对经镍柱纯化后的udp-葡萄糖脱氢酶的酶学性质进行分析。酶学性质研究表明：spyhasb的最适反应温度是30℃，最适ph10，最适条件下的比活力是12.2u/mg；ecohasb的最适反应温度是30℃，最适ph9，最适条件下的比活力是5.55u/mg。从多杀巴氏杆菌扩增出的透明质酸合成酶基因pmuhasa分别与ecohasb和spyhasb构建共表达载体pbpaeb和pbpasb。将其转化到大肠杆菌bw25113中，经生物转化生产透明质酸(ha)，并对转化条件进行了优化。结果表明：重组菌株进行透明质酸转化时，udp-葡萄糖脱氢酶酶活力越高，稳定性越好，ha产量越高；转化条件优化后，pbpaeb/bw25113和pbpasb/bw25113在摇瓶中的产量分别是1.52和1.70g/l,比之前报道的提高了2?3倍。
%K udp-葡萄糖脱氢酶
%K 酶学性质
%K 透明质酸
%K 生物转化
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc14111691&flag=1