%0 Journal Article %T 小鼠饲养过程中蛋白质组的整体重稳定性同位素标记 %A 樊锋旭? %A 高慧英? %A 徐忠伟? %A 翟琳辉? %A 衣泰龙? %A 张涛? %A 吴飞林? %A 崔春萍? %A 徐平? %J 生物工程学报 %P 1602-1611 %D 2014 %R 10.13345/j.cjb.130657 %X 文中探讨了稳定同位素代谢标记(silac)定量技术在哺乳动物模型上的应用,建立了可用于疾病模型比较蛋白质组学研究的定量内标。用含1%13c6-lysine的silac鼠粮饲养c57bl/6雌性小鼠,记为f0代,通过与雄性小鼠交配繁殖出f1代,相同方法繁殖出f2代标记小鼠。分离f2代小鼠的大脑、肺脏、心脏、胃、小肠、肝脏、脾脏、肾脏和肌肉组织,提取各组织的全蛋白,进行蛋白酶lys-c酶切,利用高效液相色谱串联质谱联用技术(lc-ms/ms)进行鉴定和定量分析。对蛋白质定量结果进行高斯拟合确定均值及标准差,得出不同脏器和小鼠整体的标记效率,肝脏的标记效率最高,为96.34%±0.90%;大脑标记效率最低,为92.62%±1.98%,小鼠整体标记效率为95.80%±0.64%,符合silac标记效率不低于95%的国际标准。成功地将silac方法从微生物和细胞系水平拓展到哺乳动物模型,这为基于动物模型研究疾病发生、发展机制提供了有力工具。 %K 稳定同位素代谢标记 %K c57bl/6小鼠 %K 定量蛋白质组学 %K 标记效率 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc14101602&flag=1