%0 Journal Article %T 小鼠t-bet逆转录病毒载体的构建与功能验证 %A 张雪洁? %A 张建华? %A 张伟? %A 郭洁? %A 周旭宇? %J 生物工程学报 %P 1586-1593 %D 2014 %R 10.13345/j.cjb.130664 %X 为在小鼠细胞中表达并研究t-bet功能,首先构建了含有报告基因thy1.1的小鼠t-bet逆转录病毒载体,并将构建的载体质粒转染病毒包装细胞系包装成重组病毒,再利用重组病毒分别感染nih-3t3和d9细胞系检测其感染能力。之后,使用该重组病毒感染t-bet敲除小鼠的cd4+t淋巴细胞,流式细胞术检测t-bet及其下游靶基因ifng的表达情况。经验证,重组的逆转录病毒感染t-bet敲除小鼠t淋巴细胞后可以在细胞中表达t-bet,并进一步引起下游靶基因ifng的表达上调,证明本研究中外源表达的转录因子t-bet具有正常功能。综上所述,本实验成功构建了含有报告基因的小鼠t-bet重组逆转录病毒载体,为进一步在小鼠细胞中研究t-bet功能奠定了基础。 %K t-bet %K 逆转录病毒 %K γ干扰素 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc14101586&flag=1