%0 Journal Article
%T 家蚕bmyan基因的克隆表达和作为microrna7靶基因的验证
%A 刘仕平？
%A 黄亚玺？
%A 尹纪云？
%A 吴小燕？
%A 周兰庭？
%A 王伟？
%A 夏庆友？
%J 生物工程学报
%P 1612-1622
%D 2015
%R 10.13345/j.cjb.140608
%X micrornas(mirnas)是一类长约22nt的非编码rna，通过与其靶基因3′端非翻译区(3′-utr)的结合来调节各项生命活动。克隆表达家蚕bmyan基因，验证其是否是bmo-mir-7的靶基因对于深入研究家蚕变态发育机制有重要意义。基于同源性检索和pcr扩增，克隆了家蚕bmyan基因cds全长，编码476个氨基酸。序列分析表明，家蚕yan蛋白的氨基酸序列保守，含sam-pnt和ets结构域。芯片数据、rt-pcr和定量pcr的检测结果表明，bmyan在五龄3d的家蚕头部、体壁、卵巢中高量表达，在其余组织中低量表达或不表达。在幼虫期，bmyan表达水平相对较低，但在上蔟期和蛹期前4d高量表达。通过3′race克隆了bmyan基因的3′-utr。rnahybrid在线软件预测了其3?-utr上bmo-mir-7的两个靶位点。构建了含有bmyan基因3′-utr和荧光素酶报告基因的转染载体，将该载体与bmo-mir-7的mimics序列共转染到家蚕胚胎细胞系bme中，通过测定荧光素酶的活性，证明了bmyan基因是bmo-mir-7的靶基因。本研究为进一步揭示bmo-mir-7和bmyan在家蚕体内的生物学功能奠定了基础。
%K 家蚕
%K bmyan
%K 克隆表达
%K microrna
%K 7
%K 靶位点
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc15111612&flag=1