%0 Journal Article %T 甲醇酵母表达系统高拷贝数整合型表达载体的构建 %A 李黄金 龙綮新 林志雄* 涂桂洪* 王珣章 %J 生物工程学报 %D 1998 %X 以甲醇酵母(hansenulapolymorpha)表达系统的yip型表达载体pjf5-1为基础,通过引入宿主来源的一个rdna随机顺序和由sv40早期启动子控制的g418抗性基因(neo)及对野生型标记基因hpleu2启动子大部分上游序列的缺失,构建了一个高拷贝整合型表达载体pmirh。有关转化、筛选和拷贝分析等试验结果表明,由pmirh可产生含高拷贝数载体的转化子,并可通过由leu2+筛选和g418抗性筛选所组成的二级筛选方法富集这些含高拷贝数载体的转化子。有关完整dna和消化dnasouthern杂交分析结果进一步表明,上述高拷贝数的载体以串联重复排列的方式整合于宿主基因组。 %K hansenula %K polymorpha %K 表达载体 %K 高拷贝数整合 %K 筛选 %K 串联重复 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=98040377&flag=1