%0 Journal Article %T 抗a型产气荚膜梭菌α毒素单链抗体基因的克隆和表达 %A 赵宝华 %A 许崇波 %J 生物工程学报 %D 2001 %X 应用rtpcr技术,从分泌具有中和活性的抗a型产气荚膜梭菌α毒素单克隆抗体的杂交瘤细胞中,扩增出抗体vh和vl基因,连接成scfv基因,并将其克隆至pgemt载体中构建了重组质粒pxscfv2e3。经序列分析证实,vh和vl基因及linker基因拼接正确,基因全长为726bp,编码242个氨基酸。随后将其定向克隆于表达载体phog21,转化至大肠杆菌xl1blue筛选出表达菌株xl1blue(phog2e3)。经elisa和sdspage分析表明,在20℃用iptg诱导培养时,表达的scfv蛋白占菌体总蛋白的25%。并且scfv基因表达产物能够中和α毒素的磷酯酶c活性 %K a型产气荚膜梭菌 %K α毒素 %K 单链抗体 %K 基因克隆 %K 基因表达 %K 中和效应 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=01050543&flag=1