%0 Journal Article %T 弓形虫gra6蛋白和p30蛋白的融合表达、纯化及抗原性分析 %A 李越希* 张锦海 陶开华 黄培堂 %J 生物工程学报 %D 2003 %X 利用基因工程技术制备抗原性好的弓形虫gra6蛋白和p30蛋白的融合蛋白,并用作抗原检测弓形虫抗体。根据弓形虫gra6蛋白和p30蛋白的氨基酸序列,通过计算机分析,筛选出其中较强的抗原决定簇。用pcr方法分别扩增含抗原决定簇的基因片段。将这两个基因片段克隆至同一质粒pet28a(+)内,表达一个融合蛋白。将重组质粒转化大肠杆菌bl21(de3),筛选表达该融合蛋白的工程菌。纯化表达的融合蛋白,用已知的6份抗弓形虫igm阳性血清和大量正常人血清,elisa法检测纯化融合蛋白的抗原性和特异性。获得了高效表达含弓形虫gra6蛋白和p30蛋白抗原表位的工程菌,表达的融合蛋白约占菌体蛋白总量的25%。纯化获得了表达的融合蛋白,该蛋白有较好的抗原性和特异性。表达的弓形虫gra6和p30融合蛋白可用做抗原检测弓形虫抗体,用于临床及孕妇检测,对优生优育有较大意义。 %K 弓形虫 %K gra6 %K p30 %K 融合蛋白 %K 基因表达 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=03060674&flag=1