%0 Journal Article %T 猪繁殖与呼吸综合征病毒嵌合感染性克隆的构建和应用 %A 李祥健? %A 张建武? %A 吕健? %A 余丹丹? %A 姚火春? %A 袁世山? %J 生物工程学报 %P 1573-1581 %D 2008 %X 高致病性猪蓝耳病近年来在我国广泛流行,目前尚无高效疫苗用于该病的防制。本研究以prrsv弱毒感染性克隆-paprrs作为主要骨架,将高致病性猪蓝耳病病毒江西分离株(jx143)的主要结构蛋白基因(orf4-7)以及3¢utr区域替换入papprs相应编码区域,构建了psx12(orf4-7-3¢utr)、p5nx12(orf5-7-3¢utr)以及p56n12(orf5-6)三个prrsv全长嵌合克隆。经dna转染marc-145细胞后拯救出嵌合病毒,并对拯救病毒进行了病毒生物学特性的分析;选取拯救病毒v56n12(orf5-6)和vsx12(orf4-7-3¢utr)免疫29日龄猪进行免疫原性试验,结果表明,以v56n12免疫后抗体水平相对较低,故免疫原性相对较差;而vsx12病毒免疫后14d血清elisa抗体达到阳性值(idexxelisa值s/p≥0.4),免疫后28d中和抗体效价从原来的1:5以下上升到1:15以上,说明vsx12具有良好的免疫原性并可进行免疫监测;免疫后28d以强毒jx143株攻毒,结果vsx12免疫组未见发病,而未免疫攻毒对照组全部发病并有1头死亡,vsx12免疫猪攻毒后病毒血症持续6d后消失,而对照组攻毒后至少持续13d,说明vsx12可对高致病性猪蓝耳病提供有效的免疫保护。本研究构建的三个嵌合病毒为开发同时抗经典和变异株prrsv感染的二价疫苗,以及探寻高致病性猪蓝耳病病毒的毒力因子奠定了基础。 %K 猪繁殖与呼吸障碍综合征 %K 高致病性猪蓝耳病 %K 感染性克隆 %K 嵌合病毒 %K 候选疫苗 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc08091573&flag=1