%0 Journal Article
%T 重叠延伸pcr法克隆人脂联素基因及其在毕赤酵母中表达
%A 张变玲？
%A 尉亚辉？
%A 张儒？
%A 姬婧媛？
%A 薛柯？
%A 荆二勇？
%A 张展鹏？
%J 生物工程学报
%P 1480-1484
%D 2008
%X 利用重叠延伸pcr法克隆出人脂联素基因,连接至克隆载体pgem-t中,转化大肠杆菌dh5a,通过测序对其进行序列分析后,进一步构建毕赤酵母表达载体ppic3.5k-adpn,通过电击法转化毕赤酵母gs115,转化的重组酵母菌用甲醇诱导外源基因表达。经pcr、southernblotting鉴定,获得了重组毕赤酵母菌株;经甲醇诱导人脂联素基因表达,westernblotting杂交鉴定证明人脂联素基因已经在毕赤酵母中成功表达。结果表明重叠延伸pcr法准确方便克隆出人脂联素基因,在30oc,1%甲醇诱导48h,人脂联素基因在巴斯德毕赤酵母中的表达最佳。
%K 人脂联素
%K 重叠延伸pcr
%K 巴斯德毕赤酵母
%K southern
%K blotting
%K western
%K blotting
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc08081480&flag=1