%0 Journal Article %T 基因工程α-半乳糖苷酶的制备及其性质研究 %A 高新* 杨军 李素波 刘泽澎 章扬培 %J 生物工程学报 %D 2004 %X 在获得可分泌表达α-半乳糖苷酶基因工程毕赤酵母菌株的基础上,尝试了基因工程α-半乳糖苷酶在5l发酵罐中的表达以及从发酵液中纯化α-半乳糖苷酶的研究。在4l无机盐培养基中接种0.4lppic9k-gal/gs115培养物,最终得到3.5l发酵液。离心所得上清中总蛋白含量为2.1g/l。根据发酵液中目的蛋白含量高、杂质少等特点,设计了如下的纯化流程:离心→超滤→阳离子交换层析→脱盐→浓缩。纯化后电泳银染结果呈单一蛋白带,总回收率41%。通过测定米氏常数等生化性质对重组酶进行鉴定后,完成了人b型红细胞的酶解实验。结果表明,从发酵液中纯化的α-半乳糖苷酶可将b型红细胞改造成o型红细胞。本研究同时在数量和质量上为α-半乳糖苷酶在众多领域的广泛应用奠定了基础。 %K α-半乳糖苷酶 %K 发酵 %K 纯化 %K 血型改造 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=03020223&flag=1