%0 Journal Article %T pras40与14-3-3蛋白各亚型相互作用的酵母双杂交系统检测 %A 刘康武? %A 黄蓓? %A 谭阳? %A 吴东明? %J 生物工程学报 %D 2007 %X pras40是近几年新发现的akt作用底物,14-3-3结合蛋白。为确定pras40与14-3-3蛋白7种亚基间相互作用关系,利用gateway方法构建用于酵母双杂交系统的诱饵质粒peg-pras40及转录激活质粒pjg-pras40,将pras40和14-3-3各亚型质粒分别作为诱饵蛋白质粒及转录激活质粒共转化酵母细胞egy48,通过氨基酸营养缺陷生长实验及β-半乳糖苷酶显色反应分析两种蛋白相互作用程度。酶切鉴定证实成功地构建了peg-pras40和pjg-pras40质粒,酵母双杂交实验结果显示pras40可以和14-3-3亚型tau,beta,zeta及epsilon相结合,epsilon较强,beta和zeta次之,tau较弱。此结果将为深入研究pras40与14-3-3蛋白生物学功能及发现药物靶标奠定基础。 %K gateway技术 %K pras40 %K 14-3-3 %K 酵母双杂交 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=07040652&flag=1