%0 Journal Article %T 重组鲁西黄牛α干扰素融合蛋白的表达及其抗病毒活性研究 %A 张永红? %A 王长法? %A 杨少华? %A 高运东? %A 王洪梅? %A 李景鹏? %A 仲跻峰? %J 生物工程学报 %D 2007 %X 通过pcr从鲁西黄牛(yellowcattle)基因组dna中克隆了α干扰素(boifn-α)基因,并插入到pet32a+中,构建成重组原核表达质粒pet32a+/boifn-α,进行测序和诱导表达。测序结果表明,鲁西黄牛ifn-α基因全长498个核苷酸,含一个开放阅读框(orf),编码166个氨基酸的成熟蛋白,与已报道的牛α干扰素c亚型氨基酸组成同源性为97.6%。表达产物经sds-page分析,表达出40kd的融合蛋白,表达量占菌体总蛋白的26.7%。表达产物经镍离子螯合次氨基三乙酸(ni-nta)亲和层析纯化,纯化产物进行复性后在mdbk/vsv上的活性为5×105u/mg。重组牛ifn-α(rboifn-α)对牛轮状病毒(brv)有一定的抑制作用,抗brv病毒活性为1.5×105u/mg。结果显示从鲁西黄牛中克隆了ifn-α基因的一种新亚型,即boifn-αc2,并实现了高效表达,获得了具有较高抗病毒活性的重组干扰素产物,为重组牛干扰素的开发奠定了基础。 %K 黄牛 %K α干扰素基因 %K 表达 %K 抗病毒活性 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=07040730&flag=1