%0 Journal Article
%T 牛asia1型口蹄疫病毒感染性克隆的构建
%A 李爽？
%A 张润祥？
%A 宋鸽？
%A 高明春？
%A 刘湘涛？
%A 王君伟？
%J 生物工程学报
%P 1621-1626
%D 2009
%X 本研究在完成asia1型口蹄疫病毒(fmdv)as01株全基因组测序的基础上,采用融合pcr扩增得到含有15个c碱基的5￠端片段(约1800bp),并利用长片段pcr扩增得到基因组3￠端片段(约6700bp)。再利用单一的酶切位点将2个片段克隆到pbluescriptsk载体中,从而获得携带as01株基因组全长cdna的重组质粒pbsas。将该质粒线性化后作为模板体外转录并转染bhk-21细胞,可观察到典型的细胞病变。对收获的病毒采用rt-pcr、间接免疫荧光和电镜观察等检测及鉴定,结果表明,拯救出了具有感染性的asia1型fmdv。拯救毒与亲本毒对乳鼠的致病力(ld50)差异不显著,具有相似的生物学特征。该感染性克隆的构建,为深入研究fmdv的致病机理及开发新型疫苗提供了有效的反向遗传操作平台。
%K 口蹄疫病毒
%K 全长cdna
%K 感染性克隆
%K 反向遗传
%K 病毒拯救
%K 体外转录
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc09001621&flag=1