%0 Journal Article %T 蒙古沙冬青干旱胁迫全长cdna文库构建及序列分析 %A 林清芳? %A 王学峰? %A 李记园? %A 赵鸿彬? %A 王茅雁? %J 生物工程学报 %P 86-95 %D 2012 %X 为了规模化分离强抗逆植物蒙古沙冬青ammopiptanthusmongolicus(maxim.)chengf.的抗旱基因并探讨其抗旱性分子机理,用smart(switchingmechanismat5¢-endofrnatranscript)技术构建了其在干旱胁迫下的全长cdna文库。原始文库滴度为1.6×107pfu/ml,重组率为97.7%,插入片段长度多数接近和超过1kb。对3000个阳性克隆进行了5¢端测序和序列分析,共获得1450条unigene序列。在nt、nr和swissprot等数据库中进行blast搜索,结果有919条(占63.4%)与已知或推测功能的基因具有同源性,其余531条(占36.6%)为功能未知的新基因。将unigene进行geneontology(go)功能分类,其中与生理过程、细胞过程、结合、催化活性和细胞组分相关的基因所占比例较高,其次是与细胞器、蛋白复合体、运输和结构分子活性相关的基因,与刺激应答、基因表达调节、生理生化调节和信号转导相关的基因也占相当比例。许多有功能注释的unigene属于抗逆相关基因,用半定量rt-pcr方法分析其中6个基因的表达变化,证明其均参与对干旱胁迫的应答反应。为进一步开展表达谱分析和克隆、鉴定抗旱基因奠定了基础。 %K 沙冬青 %K 干旱 %K cdna文库 %K 序列分析 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc12000087&flag=1