%0 Journal Article %T 水母雪莲黄酮合成酶fnsii基因克隆及其在3种细胞系中的表达 %A 王冰洁? %A 李厚华? %A 王亚杰? %A 高艳? %A 付婉艺? %A 魏新翠? %J 生物工程学报 %P 1720-1727 %D 2015 %R 10.13345/j.cjb.150059 %X 水母雪莲是中国传统珍稀药材,其主要活性成分之一木犀草素具有预防和治疗癌症的功效。以水母雪莲绿色细胞系为试材,采用rt-pcr和race-pcr方法获得1个水母雪莲fnsii基因cdna全长,命名为smfnsii(genbank登录号为kf170286)。序列分析结果表明:smfnsii全长1710bp,包含34bp的5?非编码区、125bp的3?非编码区和1个长度为1551bp编码516个氨基酸的开放阅读框。氨基酸序列分析表明smfnsii属于细胞色素p450cyp93b亚家族单氧化酶。序列比对和系统进化分析表明,smfnsii氨基酸序列与同科植物毛山柳菊的亲缘关系最近,相似性达87%以上。实时荧光定量pcr分析表明,smfnsii在白色、绿色和红色细胞系均有表达,红色系中的表达量最高,白色系中表达量最低,此结果与高效液相色谱分析3种颜色细胞系中木犀草素含量结果一致。构建pet-smfnsii原核表达重组质粒,并在大肠杆菌中诱导表达,诱导蛋白大小与预期一致。通过筛选fnsii基因表达水平高、高产木犀草素的水母雪莲细胞系和植株,可培育抗炎抗癌活性较高、具有高保健功能的雪莲生药新品种。 %K 水母雪莲 %K 黄酮合成酶fnsii %K 基因克隆 %K 表达分析 %K 原核表达 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc15121720&flag=1