%0 Journal Article %T 共表达分子伴侣pdi和ero1对灰盖鬼伞过氧化物酶在毕赤酵母中表达的影响 %A 陈飞? %A 胡美荣? %A 江贤章? %A 陶勇? %A 黄建忠? %J 生物工程学报 %P 1682-1689 %D 2015 %R 10.13345/j.cjb.150051 %X 来源于灰盖鬼伞长度为1092bp的cip目的基因与aox1启动子一起整合进酵母染色体基因组中。重组蛋白cip在酿酒酵母信号肽的引导下成功分泌到胞外,质谱鉴定为目的蛋白,成功在毕赤酵母中表达灰盖鬼伞过氧化物酶(cip)。将伴侣蛋白内质网氧化还原酶1(ero1)、二硫键异构酶(pdi)分别单独及同时转入cip酵母受体菌中,研究它们对cip在毕赤酵母中表达的影响。结果表明:在摇瓶中,相对于无分子伴侣的菌株,单独整合pdi及同时整合ero1、pdi菌株的cip酶活分别提高了2.43和2.62倍,活力达到316u/ml和340u/ml。挑选同时整合ero1、pdi伴侣蛋白的cip菌株,5l发酵罐进行高密度发酵,酶活最高达到3379u/ml,比摇瓶提高约10倍。本实验结果较目前已报道的1200u/ml已是最高水平。 %K 毕赤酵母 %K 灰盖鬼伞过氧化物酶 %K 内质网氧化还原酶 %K 二硫键异构酶 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc15121682&flag=1