%0 Journal Article %T 小麦种子过氧化物酶wp1基因的原核表达、纯化及多克隆抗体制备 %A 单丽伟? %A 唐如春? %A 刘三阳? %A 范三红? %A 郭蔼光? %J 生物工程学报 %P 26-30 %D 2011 %X wp1是小麦种子中最主要的阳离子过氧化物酶,该酶不仅参与种子的发育过程,而且影响面粉的加工品质。首先构建了wp1基因原核表达载体pet28a-wp1,并将其转化到t7expression大肠杆菌菌株中诱导表达。his-tag融合的wp1主要以包涵体形式存在,使用ni-nta亲和层析柱在变性条件下进行纯化,获得纯度大于98%的重组蛋白。重组wp1经尿素梯度透析复性溶解后免疫新西兰大白兔,最终获得wp1多克隆抗体。elisa分析结果显示制备的wp1兔抗血清的效价大于1∶625000;westernblotting结果证明制备的多克隆抗体对wp1具有很好的专一性。 %K 小麦 %K 种子过氧化物酶 %K wp1 %K 表达纯化 %K 抗体制备 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc11000026&flag=1