%0 Journal Article
%T 拟南芥硫酯酶基因在毕赤酵母中的表达
%A 郝昭程？
%A 王腾飞？
%A 李忠奎？
%A 郝梓凯？
%A 戴琨？
%A 王瑞明？
%J 生物工程学报
%P 115-122
%D 2015
%R 10.13345/j.cjb.140205
%X 硫酯酶在生物体内能催化水解脂酰酰基载体蛋白和饱和脂肪脂酰链，对中链脂肪酸(mediumchainfattyacids，mcfas)的积累起着关键作用。为获得具有生产中链脂肪酸能力的工程菌，以拟南芥cdna为模板，pcr扩增得到其脂酰-acp硫酯酶基因atfata，经ecorⅰ/xbaⅰ双酶切后连接至同样双酶切的质粒中，获得重组质粒ppiczαa-atfat。将重组质粒电击转入毕赤酵母gs115中，通过zeocin抗性筛选，挑选出阳性克隆子并摇瓶发酵诱导，sds-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析获得明显目的蛋白条带，首次成功构建atfata的真菌表达系统。气质联用法检测发酵产物胞外游离脂肪酸，发现毕赤酵母atfata重组菌株比起始gs115菌株胞外游离mcfas(主要是辛酸)产量增加51%，mcfas产量占胞外总脂肪酸产量的28.7%，而野生菌中这一比例仅有18.1%，这为日后生产安全无毒害的mcfas探索了一条新的途径。
%K 拟南芥
%K 脂酰-acp硫酯酶
%K 毕赤酵母
%K 基因重组表达
%K 游离中链脂肪酸
%K 胞外
%U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc15010115&flag=1