%0 Journal Article %T 过量表达烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶对大肠杆菌nzn111产丁二酸的影响 %A 苟冬梅? %A 梁丽亚? %A 刘嵘明? %A 张常青? %A 吴明科? %A 马江锋? %A 陈可泉? %A 朱建国? %A 姜岷? %J 生物工程学报 %P 1059-1069 %D 2012 %X 大肠杆菌nzn111是敲除了乳酸脱氢酶的编码基因(ldha)和丙酮酸-甲酸裂解酶的编码基因(pflb)的发酵生产丁二酸的潜力菌株。厌氧条件下nadh不能及时再生为nad+,引起胞内辅酶nad(h)的不平衡,最终导致厌氧条件下菌株不能利用葡萄糖生长代谢。nadd为催化nad(h)合成途径中烟酸单核苷酸(namn)生成烟酸腺嘌呤二核苷酸(naad)的烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶(nicotinicacidmononucleotideadenylyltransferase,namnat)的编码基因,通过过量表达nadd基因能够提高nad(h)总量与维持合适的nadh/nad+比例。文中构建了重组菌e.colinzn111/ptrc99a-nadd,在厌氧摇瓶发酵过程中通过添加终浓度为1.0mmol/l的iptg诱导表达,重组菌e.colinzn111/ptrc99a-nadd中nad+和nadh的浓度分别比宿主菌e.colinzn111提高了3.21倍和1.67倍,nad(h)总量提高了2.63倍,nadh/nad+从0.64降低为0.41,使重组菌株恢复了厌氧条件下生长和代谢葡萄糖的能力。重组菌与对照菌相比,72h内可以消耗14.0g/l的葡萄糖产6.23g/l的丁二酸,丁二酸产量增加了19倍。 %K 丁二酸 %K 烟酸单核苷酸腺苷酰转移酶 %K 厌氧发酵 %K 大肠杆菌nzn111 %K nadh/nad+ %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=gc12001059&flag=1