%0 Journal Article %T 里氏木霉内切-β-甘露聚糖酶基因在毕赤酵母中的表达 %A 韦跃华 毛爱军 何永志 乔宇 董志扬* %J 生物工程学报 %D 2005 %X 采用pcr方法从里氏木霉(trichodermareesei)基因组中获得含有两个内含子的内切-β-甘露聚糖酶全长基因,末端重叠延伸pcr去除内含子后,将其插入到巴斯德毕赤酵母(picherpastoris)表达载体ppic9k中,位于α-因子信号肽序列的下游,并与之同框,获得重组质粒pm242。重组质粒线性化后用电击法转化毕赤酵母菌株gs115。经大量筛选,获得高效分泌表达内切甘露聚糖酶的毕赤酵母工程菌株gpmf25。摇瓶发酵结果表明,培养基中甘露聚糖酶的活力可达12.5iu/ml。重组酶最适ph和最适反应温度分别为5.0和80℃,在ph5.0~6.0时酶活稳定,在ph5.4时70℃保温30min酶活维持50%以上。 %K 内切甘露聚糖酶 %K 分泌表达 %K 酶学性质 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=05060878&flag=1