%0 Journal Article %T 抗松材线虫纤维素酶单链抗体库的构建及筛选 %A 田旺 张奇 杨文博 白钢* %J 生物工程学报 %D 2005 %X 构建鼠源性松材线虫纤维素酶(bursaphelenchusxylophiluscellulase,bxc)的噬菌体单链抗体库,从中筛选特异性bxc的单链抗体。以bxc为抗原免疫balb/c小鼠,从脾脏提取总rna,用rt-pcr技术扩增小鼠抗体重链(vh)和轻链(vl)可变区基因。经重叠pcr(soe-pcr)在体外将vh和vl连接成单链抗体(scfv)基因,并克隆到噬菌粒载体pcantab5e中,电转化至大肠杆菌tg1,经辅助噬菌体超感染,成功构建了库容为5×104的anti-bxc单链抗体库,并从该抗体库中初步筛选到了特异性识别bxc的噬菌体单链抗体scfv。将表面展示单链抗体的单克隆噬菌体转化大肠杆菌hb2151进行可溶性表达,sds-page及westernblot分析结果显示,可溶性scfv获得表达,且与bxc具有结合活性,为松材线虫的检验检疫以及病理学研究奠定了基础。 %K 松材线虫 %K 纤维素酶 %K 单链抗体 %K 噬菌体抗体库 %K 筛选 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=05060900&flag=1