%0 Journal Article %T 蚯蚓纤溶酶新基因efp-0的电子克隆及其编码区序列rt-pcr验证 %A 赵晓瑜* 高珊 崔大岺 耿风廷 %J 生物工程学报 %D 2006 %X 利用生物信息学手段,以期获得蚯蚓纤溶酶f-ⅰ-0组分的基因。根据从粉正蚓(lumbricusrubellus)中分离的fⅰ0组分的n端氨基酸序列vvggsdttigqyphql,利用dnaman软件通过电子克隆方法,从lumbricidae的dbest中获得该组分的核酸序列信息,设计特异引物,经过rt-pcr,成功地从赤子爱胜蚓(eiseniafoetida)中克隆到一条蚯蚓纤溶酶新基因,命名为efp-0。efp-0基因全长678bp,编码225个氨基酸的成熟肽,属丝氨酸蛋白酶,胰蛋白酶家族,与f-ⅰ-0组分的氨基酸组成非常接近。blast证明,efp-0与已报道的蚯蚓纤溶酶基因之间的相似性均低于40%,因此为蚯蚓纤溶酶中的一个新基因,genbank登录号为dq836917。构建的pmal-c2x-efp-0重组质粒,在大肠杆菌tb1中获得融合蛋白mbp-efp-0的可溶性表达,表达产物有酪蛋白平板溶解活性。 %K 蚯蚓纤溶酶 %K 电子克隆 %K efp-0 %U http://journals.im.ac.cn/cjbcn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=06060897&flag=1